PRÁCTICA 23: DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE SANGRE OCULTA EN HECES POR INMUNOCROMATOGRAFÍA

19.02.2020

OBJETIVO

Determinación de sangre oculta en heces con el fin de diagnosticar neoplasias digestivas y anemias ferropénicas sin causa evidente.

FUNDAMENTO

Por medio de inmunocromatografía vamos a utilizar una muestra de heces y por medio de un Ac anti Hb incluido en la placa podremos saber si existe sangre oculta en heces para un correcto diagnóstico.

Material necesario:
  • Tubo colector: que contiene 2 mL de 0,1 M de PBS
  • Test Nadal
  • Pipeta pasteur
  • Cronómetro
  • Placa de Petri
Muestra:
Heces 



PROCEDIMIENTO

En un primer momento cogimos el recipiente de boca ancha que contenía las heces. Tras ello nos disponemos a adulterar un poco una con sangre para así asegurarnos ver una muestra positiva, para ello extraemos con ayuda de una pipeta pasteur un poco de heces (tamaño de un garbanzo) y lo disponemos en una placa de Petri, luego una persona se punciona con una lanceta para obtener sangre capilar, luego mezclemos ambas.





Y por otro lado usamos la muestra sin adulterar.

Seguidamente cogimos el tubo colector horizontalmente y abrimos el tapón azul, luego extraer el aplicador de muestras de color azul.

Luego introducimos el aplicador en tres puntos diferentes de las heces. Y volvimos a reinsertar el aplicador en el tubo y cerramos el tapón con firmeza. Tener cuidado de no romper la punta del aplicador.





Luego sacamos el test de su envoltorio antes de la realización del análisis y agitamos el tubo minuciosamente para asegurar la perfecta mezcla de la muestra fecal con la solución.

Luego, utilizando un pañuelo de papel rompemos la punta del aparato mediante un movimiento giratorio. Mantener la mezcla y el tubo en posición vertical y dispensar tres gotas (app. 120 µL) de la solución obtenida en el orificio de la caja.
Realizamos este proceso con las dos muestras.

Luego interpretamos el resultado a los 5 minutos. Los resultados claramente positivos pueden aparecer antes. No se deben interpretar resultados transcurridos 8 minutos. 

RESULTADOS:

El de la muestra contaminada apreciamos un claro positivo por la aparición de dos líneas de color rosa-rojo.

El de la muestra no contaminada se observó un resultado negativo puesto que no apareció la línea test aunque si la de control por lo que el test fue válido pero negativo.
NOTA: La presencia de solo la línea test, o de ninguna línea es debido a que el test no se ha realizado correctamente por que la línea control (posee el Ac anticonjugado que siempre debe marcarse) por lo que en alguno de estos casos deberíamos volver a repetir la prueba.

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