PRÁCTICA 18: DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE CREATININA
30.01.2020
PRINCIPIO DEL MÉTODO
SIGNIFICADO CLÍNICO
3. Mezclar y poner en marcha el cronómetro.
PRINCIPIO DEL MÉTODO
El ensayo de la creatinina está basado en la reacción de la creatinina con el picrato alcalino descrito por Jaffé. La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra ensayada .
SIGNIFICADO CLÍNICO
La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células.
La producción de creatinina depende de la modificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen ser muy estables.
elimina a través del riñón. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico. Niveles altos de creatinina son indicativos de patología renal . El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
MATERIAL
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 492 nm.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Micropipetas y puntas
- Tubos de ensayo
- Gradillas
MUESTRAS
- Suero
PROCEDIMIENTO
Reactivo de trabajo (RT): Mezclar volúmenes iguales de R 1 Reactivo Pícrico y de R 2 Reactivo Alcalinizante. Preparamos un volumen suficiente para que tuviesen todos los grupos de clase.
1. Ajustamos el espectrofotómetro a una longitud de onda de 492 nm
2. Pipetear en tubos de ensayo:
3. Mezclar y poner en marcha el cronómetro.
4. Leer la absorbancia (A1) al cabo de 30 segundos y al cabo de 90 segundos (A2) de la adición de la muestra.
NOTA: Como en esta práctica es muy importante el tiempo lo que hicimos fue realizar el patrón y muestras al lado del espectrofotómetro para así no tener problemas con el tiempo. Primero realizamos el patrón y luego la muestra.
5. Calcular: A= A2 – A1 tanto de patrón como de muestra y realizamos los cálculos.
Estos fueron los resultados:
CÁLCULOS
Estos fueron los resultados:
CÁLCULOS
∆A Muestra/ ∆A Patrón x 2 (Conc. Patrón) = mg/dL de creatinina en la muestra
(0.004/ 0.007) x 2 = 1.14 mg/dL
Vemos que se encuentra dentro de los valores de referencia.
VALORES DE REFERENCIA
- Suero o plasma:
Hombres 0,7 - 1,4 mg/dL 61,8 - 123,7 µmol/L
Mujeres 0,6 - 1,1 mg/dL 53,0 - 97,2 µmol/L
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