ANÁLISIS BIOQUÍMICO

27.11.19 OBJETIVO Con esta práctica vamos a realizar mediante técnicas electroquímicas la identificación y cuantificación de proteínas. La electroforesis es una técnica de separación de mezclas para su caracterización que se basan en la diferencia de movilidad en un campo eléctrico de las moléculas que las forman. FUNDAMENTO Las proteínas, moléculas anfóteras, en medio básico adquieren carga global negativa que hace que migren del cátodo hacia el ánodo cuando son sometidas a un proceso electroforético. Como consecuencia de la migración se obtienen cinco fracciones correspondientes a diferentes proteínas plasmáticas con carga negativa decreciente: Albúmina (la más negativa) Alfa1-globulinas. Alfa2-globulinas. Beta-globulinas Gamma-globulinas (las más negativas) Material necesario: Alimentador y cubeta de electroforesis Aplicador Tiras de acetato de celulosa Láminas Mylar Papel de filtro Reactivos: Solución tampón (tris hipurato) Colorante Rojo Ponceau Deco

18.11.19 OBJETIVO El método de Biuret es una prueba para la determinación de proteínas totales que tiene como fin su análisis basándose en la capacidad que tienen los enlaces peptídicos de unirse a sales cúpricas en medio alcalino, dando lugar a un precipitado coloreado de color azul-violáceo. Es la técnica de referencia de proteínas totales. Además debe haber mínimo dos enlaces peptídicos por lo que no se pueden utilizar en dipéptidos ni en aminoácidos. Por lo que el objetivo de esta práctica sería saber realizar correctamente este método de referencia tan importante para las proteínas totales. FUNDAMENTO Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, que actúan como elementos estructurales y de transporte. Su determinación es útil en la detección de: Hiperproteinemia producida por hemoconcentración, deshidratación o aumento de proteínas específicas. Hipoproteinemias por hemodilución debido a defecto de síntesis proteico, etc. Material necesario: Gradillas

14.11.19 OBJETIVO Realizar una medida de hemoglobina glicosilada utilizando Nyco Card READER II que es un densitómetro de color con una pequeña batería, las respuestas de color son medidas por reflectancia espectral en las tres partes de un espectro visible. FUNDAMENTO La hemoglobina glicosilada es una porción de la hemoglobina Hb A1c que se encuentra unida de forma irreversible a la glucosa mediante enlaces covalentes. Se forma dentro de los hematíes siendo su cantidad proporcional a los niveles de glucosa y permanece en ellos hasta que son destruidos. Es una prueba útil para el seguimiento del diabético, ya que es un fiel reflejo de sus niveles de glucosa en los dos últimos meses. El proceso consiste en hemolizar la muestra para liberar la Hb-glicada del interior del hematíe. La cuantificación puede hacerse por cromatografía o por métodos inmunoturbidimetricos o colorimétricos. Los valores de referencia son 4,5% a 5,7%. Material necesario: Densitómetro NycoCard Tubo d